Metformin je perorální antidiabetikum, které se běžně používá pro léčbu diabetes mellitus 2. typu především u pacientů s nadváhou. V současné době však není metformin spojován pouze s diabetem jako antihyperglykemické léčivo. Zkoumají se jeho možné příznivé účinky při léčbě dalších onemocnění, jako je rakovina, kardiovaskulární a neurodegenerativní onemocnění, stejně tak jeho antibakteriální nebo antivirové účinky.
Cílem této diplomové práce je depozice metforminu na povrch zvoleného syntetického polymerního materiálu, následná charakterizace připravených substrátů dostupnými metodami a zjistit, zda má metformin potenciál jakožto antimikrobiální činidlo.
Nejprve byl metformin deponován pomocí vícestupňového fyzikálně-chemického procesu na polymerní nosič z nízkohustotního polyethylenu (LDPE). Tento proces zahrnoval ošetření povrchu pomocí plazmového výboje, navázání kyseliny akrylové na povrch a EDC, který umožnil navázání aminových skupin metforminu s povrchovými karboxylovými skupinami. Připravené substráty byly charakterizovány pomocí FTIR, měření mezního kontaktního úhlu a povrchové energie, SEM a XPS. K determinaci antibakteriální aktivity připravených povrchů s deponovaným metforminem byly použity kmeny bakterií Escherichia coli (CCM 4517) a Staphylococcus aureus (CCM 4516), přičemž samotné testování probíhalo podle norem ČSN ISO 22196 a ČSN EN ISO 20743.
Na základě použitým metod bylo prokázáno, že depozice metforminu na povrch LDPE proběhla úspěšně. Stejné tvrzení ovšem neplatí v případě výsledků z antibakteriálního testu. Z toho totiž vyplývá, že metformin prokazuje pouze minimální antibakteriální aktivitu, vůči použitým bakteriálním kmenům. Jediný vzorek, u kterého se naměřila antibakteriální aktivita byl vzorek s koncentrací deponovaného metforminu 1 gl-1 vůči bakterii Escherichia coli. Ze získaných výsledků se dá tedy konstatovat, že využití metforminu jakožto antibakteriálního činidla se zdá být velmi omezené. Nicméně v době odevzdání této práce nebyly k dispozici výsledky z antibakteriálního testu vzorků s vyšší koncentrací deponovaného metforminu a budou tak předmětem dalšího zkoumání.
Anotace v angličtině
Metformin is an oral antidiabetic drug that is commonly used for treating type 2 diabetes mellitus, especially in overweight patients. However, nowadays, metformin is no longer associated only with diabetes as an antihyperglycemic drug. Its possible beneficial effects in the treatment of other diseases such as cancer, cardiovascular and neurodegenerative diseases, as well as its antibacterial or antiviral effects are being investigated.
The aim of this diploma thesis was to deposit metformin on the surface of a selected synthetic polymer material, further characterize the prepared substrate using available methods and determine whether metformin has potential as an antimicrobial agent.
Firstly, metformin was deposited using physico-chemical multistep process onto a polymeric carrier from low-density polyethylen (LDPE). This process involved treating the surface using plasma, bonding of acrylic acid to the surface and EDC, which binds the surface carboxyl groups with metformin amine groups. The prepared substrates were characterized by FTIR, measuring the limiting contact angle and surface energy, SEM and XPS. The bacterial strains of Escherichia coli and Staphylococcus aureus were used to determine the antibacterial activity of the prepared surfaces with deposited metformin, and the testing itself was carried out according to ISO 22196 and ISO 20743 standards.
Based on the used methods, it was shown that the deposition of metformin on the LDPE surface was successful. However, the same statement is not true for the results from the antibacterial test. This determined that metformin shows only minimal antibacterial activity against the bacterial strains used. The only sample for which antibacterial activity was recorded was a sample with a deposited metformin concentration of 1 gl-1 against Escherichia coli. Thus, from the results obtained, it can be concluded that the use of metformin as an antibacterial agent appears to be very limited. However, at the time of submission of this thesis, results from the antibacterial test of samples with higher concentrations of deposited metformin were not available and thus will be subject of further investigation.
Metformin je perorální antidiabetikum, které se běžně používá pro léčbu diabetes mellitus 2. typu především u pacientů s nadváhou. V současné době však není metformin spojován pouze s diabetem jako antihyperglykemické léčivo. Zkoumají se jeho možné příznivé účinky při léčbě dalších onemocnění, jako je rakovina, kardiovaskulární a neurodegenerativní onemocnění, stejně tak jeho antibakteriální nebo antivirové účinky.
Cílem této diplomové práce je depozice metforminu na povrch zvoleného syntetického polymerního materiálu, následná charakterizace připravených substrátů dostupnými metodami a zjistit, zda má metformin potenciál jakožto antimikrobiální činidlo.
Nejprve byl metformin deponován pomocí vícestupňového fyzikálně-chemického procesu na polymerní nosič z nízkohustotního polyethylenu (LDPE). Tento proces zahrnoval ošetření povrchu pomocí plazmového výboje, navázání kyseliny akrylové na povrch a EDC, který umožnil navázání aminových skupin metforminu s povrchovými karboxylovými skupinami. Připravené substráty byly charakterizovány pomocí FTIR, měření mezního kontaktního úhlu a povrchové energie, SEM a XPS. K determinaci antibakteriální aktivity připravených povrchů s deponovaným metforminem byly použity kmeny bakterií Escherichia coli (CCM 4517) a Staphylococcus aureus (CCM 4516), přičemž samotné testování probíhalo podle norem ČSN ISO 22196 a ČSN EN ISO 20743.
Na základě použitým metod bylo prokázáno, že depozice metforminu na povrch LDPE proběhla úspěšně. Stejné tvrzení ovšem neplatí v případě výsledků z antibakteriálního testu. Z toho totiž vyplývá, že metformin prokazuje pouze minimální antibakteriální aktivitu, vůči použitým bakteriálním kmenům. Jediný vzorek, u kterého se naměřila antibakteriální aktivita byl vzorek s koncentrací deponovaného metforminu 1 gl-1 vůči bakterii Escherichia coli. Ze získaných výsledků se dá tedy konstatovat, že využití metforminu jakožto antibakteriálního činidla se zdá být velmi omezené. Nicméně v době odevzdání této práce nebyly k dispozici výsledky z antibakteriálního testu vzorků s vyšší koncentrací deponovaného metforminu a budou tak předmětem dalšího zkoumání.
Anotace v angličtině
Metformin is an oral antidiabetic drug that is commonly used for treating type 2 diabetes mellitus, especially in overweight patients. However, nowadays, metformin is no longer associated only with diabetes as an antihyperglycemic drug. Its possible beneficial effects in the treatment of other diseases such as cancer, cardiovascular and neurodegenerative diseases, as well as its antibacterial or antiviral effects are being investigated.
The aim of this diploma thesis was to deposit metformin on the surface of a selected synthetic polymer material, further characterize the prepared substrate using available methods and determine whether metformin has potential as an antimicrobial agent.
Firstly, metformin was deposited using physico-chemical multistep process onto a polymeric carrier from low-density polyethylen (LDPE). This process involved treating the surface using plasma, bonding of acrylic acid to the surface and EDC, which binds the surface carboxyl groups with metformin amine groups. The prepared substrates were characterized by FTIR, measuring the limiting contact angle and surface energy, SEM and XPS. The bacterial strains of Escherichia coli and Staphylococcus aureus were used to determine the antibacterial activity of the prepared surfaces with deposited metformin, and the testing itself was carried out according to ISO 22196 and ISO 20743 standards.
Based on the used methods, it was shown that the deposition of metformin on the LDPE surface was successful. However, the same statement is not true for the results from the antibacterial test. This determined that metformin shows only minimal antibacterial activity against the bacterial strains used. The only sample for which antibacterial activity was recorded was a sample with a deposited metformin concentration of 1 gl-1 against Escherichia coli. Thus, from the results obtained, it can be concluded that the use of metformin as an antibacterial agent appears to be very limited. However, at the time of submission of this thesis, results from the antibacterial test of samples with higher concentrations of deposited metformin were not available and thus will be subject of further investigation.
Cílem práce bude depozice metforminu prostřednictvím vícestupňového fyzikálně-chemického procesu na povrch zvoleného syntetického polymerního materiálu. Takto připravený substrát bude dále charakterizován pomocí dostupných metod na UTB a partnerských institucích.
1. Vypracujte literární rešerši na zadané téma.
2. Deponujte metformin na povrch syntetického polymerního materiálu.
3. Charakterizujte výsledné substráty pomocí měření mezního úhlu smáčení a povrchové enetgie, FTIR, XPS, SEM.
4. Analyzujte antibakteriální vlastnosti připravených povrchů.
5. Získané výsledky přehledně zpracujte a kriticky vyhodnoťte s ohledem na aplikační možnosti.
Zásady pro vypracování
Cílem práce bude depozice metforminu prostřednictvím vícestupňového fyzikálně-chemického procesu na povrch zvoleného syntetického polymerního materiálu. Takto připravený substrát bude dále charakterizován pomocí dostupných metod na UTB a partnerských institucích.
1. Vypracujte literární rešerši na zadané téma.
2. Deponujte metformin na povrch syntetického polymerního materiálu.
3. Charakterizujte výsledné substráty pomocí měření mezního úhlu smáčení a povrchové enetgie, FTIR, XPS, SEM.
4. Analyzujte antibakteriální vlastnosti připravených povrchů.
5. Získané výsledky přehledně zpracujte a kriticky vyhodnoťte s ohledem na aplikační možnosti.
Seznam doporučené literatury
[1] Asadinezhad A., Novák I., Lehocký M., Sedlařík V., Vesel A., Junkar I., Sáha P. and Chodák I.: A Physicochemical Approach to Render Antibacterial Surfaces on Plasma-Treated Medical-Grade PVC: Irgasan Coating, Plasma Processes and Polymers, 7 (2010) 504-514.
[2] Bílek F., Sulovská K., Lehocký M., Sáha P., Humpolíček P., Mozetič M. and Junkar I.: Preparation of Active Antibacterial LDPE Surface Through Multistep Physicochemical Approach II: Graft Type Effect on Antibacterial Properties, Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 102 (2013) 842-848.
[3] Popelka A., Novák I., Lehocký M., Bílek F., Kleinová A., Mozetič M., Špírková M. and Chodák I.: Antibacterial Treatment of LDPE with Halogen Derivatives via Cold Plasma, Express Polymer Letters, 9 (2015) 402-411.
[4] Ozaltin, K., Lehocký M., Humpolíček P., Veselá D., Mozetič M., Novák I. and Sáha P.: Preparation of active antibacterial biomaterials based on sparfloxacin, enrofloxacin, and lomefloxacin deposited on polyethylene, Journal of Applied Polymer Science. 135 (2018) 46174 (7pp).
[5] Habib S., Lehocky M., Vesela D., Humpolicek P., Krupa I. and Popelka A.: Preparation of Progressive Antibacterial LDPE Surface via Active Biomolecule Deposition Approach, Polymers 11 (2019) 1704 (15 pp).
Seznam doporučené literatury
[1] Asadinezhad A., Novák I., Lehocký M., Sedlařík V., Vesel A., Junkar I., Sáha P. and Chodák I.: A Physicochemical Approach to Render Antibacterial Surfaces on Plasma-Treated Medical-Grade PVC: Irgasan Coating, Plasma Processes and Polymers, 7 (2010) 504-514.
[2] Bílek F., Sulovská K., Lehocký M., Sáha P., Humpolíček P., Mozetič M. and Junkar I.: Preparation of Active Antibacterial LDPE Surface Through Multistep Physicochemical Approach II: Graft Type Effect on Antibacterial Properties, Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 102 (2013) 842-848.
[3] Popelka A., Novák I., Lehocký M., Bílek F., Kleinová A., Mozetič M., Špírková M. and Chodák I.: Antibacterial Treatment of LDPE with Halogen Derivatives via Cold Plasma, Express Polymer Letters, 9 (2015) 402-411.
[4] Ozaltin, K., Lehocký M., Humpolíček P., Veselá D., Mozetič M., Novák I. and Sáha P.: Preparation of active antibacterial biomaterials based on sparfloxacin, enrofloxacin, and lomefloxacin deposited on polyethylene, Journal of Applied Polymer Science. 135 (2018) 46174 (7pp).
[5] Habib S., Lehocky M., Vesela D., Humpolicek P., Krupa I. and Popelka A.: Preparation of Progressive Antibacterial LDPE Surface via Active Biomolecule Deposition Approach, Polymers 11 (2019) 1704 (15 pp).
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
ilustrace, grafy, schémata, tabulky
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Student představil komisi výsledky své diplomové práce. Poté byla komise seznámena s posudky a hodnocením vedoucího a oponenta (hodnocení vedoucího: A - výborně, hodnocení oponenta: A - výborně). V rámci posudků byly studentovi položeny následující dotazy oponenta: Ing. Kateřina Štěpánková, Ph.D. – V tab. 5 referenční neošetřený vzorek LDPE vykazuje nižší počet životaschopných bakteriálních buněk oproti ošetřeným vzorkům. Čím si tuto skutečnost vysvětlujete? ZODPOVĚZEN ZCELA; Proč si myslíte, že deponovaný metformin vykazuje pouze minimální antibakteriální aktivitu? ZODPOVĚZEN ZCELA; Jaké faktory by mohly ovlivnit účinnost metforminu jako antimikrobiálního činidla? Chybí hlubší diskuse o výsledcích v kontextu existující literatury, zejména týkající se antimikrobiálních vlastností metforminu (např. vymezení metforminu jako adjuvantního antimikrobiálního činidla) ZODPOVĚZEN ZCELA
Poté byla vedena diskuze o diplomové práci, během které byly jednotlivými členy komise položeny následující dotazy: doc. Ing. Jana Sedlaříková, Ph.D. – Jaká byla reprodukovatelnost měření smáčivosti? ZODPOVĚZEN ZCELA; Jak se měřila antibakteriální vlastnost Vašich vzorků? ZODPOVĚZEN ZCELA; Jak se provádí oplach antibakteriálních vzorků? ZODPOVĚZEN ZCELA; doc. Ing. Rahula Janiš, CSc. - Byly antibakteriální vlastnosti vyzkoušeny pouze na povrchu Vašich vzorků? ZODPOVĚZEN ZCELA; doc. Ing. Věra Kašpárková, CSc. - Nalezli jste MIC metforminu a jak by to eventuelně ovlivnilo/souviselo s přípravou a testováním Vašich vzorků? ZODPOVĚZEN ZCELA