Bakalářská práce pojednává o jedné z nejdůležitější složek extracelulární matrix - kolagenu - a její produkci pomocí buněčných kultur in vitro. Kolagen se v současné době stal díky své biokompatibilitě, biodegradabilitě a skvělým mechanickým vlastnostem velmi žádaným biomateriálem. Využití našel v mnoha oblastech, mezi které patří tkáňové inženýrství, regenerativní medicína, farmaceutický či kosmetický průmysl a další. V této práci byl za pomoci buněčné linie lidských dermálních fibroblastů vytvořen CAM sheet, po jehož devitalizaci a decelularizaci byl proveden proliferační test sloužící k poskytnutí informace, zda je buňkami vytvořený CAM sheet vhodným scaffoldem pro růst jiných typů buněčných linií. Vyhodnocení proběhlo sledováním nabarvených buněčných struktur pomocí fluorescenčního mikroskopu.
Anotace v angličtině
The bachelor thesis deals with one of the most important components of the extracellular matrix - collagen - and how it is produced using cell cultures in vitro. Collagen has nowadays become a highly desirable biomaterial due to its biocompatibility, biodegradability and excellent mechanical properties. It has found applications in a wide range of fields, including tissue engineering, regenerative medicine, the pharmaceutical and cosmetic industry, and others. In this work, a CAM sheet was produced using the human dermal fibroblast cell line. After devitalization and decellularization, a proliferation assay was performed to provide information on whether the cell-derived CAM sheet was a suitable scaffold for the growth of other cell line types. The evaluation was performed by observing the stained cell structures using a fluorescence microscope.
Bakalářská práce pojednává o jedné z nejdůležitější složek extracelulární matrix - kolagenu - a její produkci pomocí buněčných kultur in vitro. Kolagen se v současné době stal díky své biokompatibilitě, biodegradabilitě a skvělým mechanickým vlastnostem velmi žádaným biomateriálem. Využití našel v mnoha oblastech, mezi které patří tkáňové inženýrství, regenerativní medicína, farmaceutický či kosmetický průmysl a další. V této práci byl za pomoci buněčné linie lidských dermálních fibroblastů vytvořen CAM sheet, po jehož devitalizaci a decelularizaci byl proveden proliferační test sloužící k poskytnutí informace, zda je buňkami vytvořený CAM sheet vhodným scaffoldem pro růst jiných typů buněčných linií. Vyhodnocení proběhlo sledováním nabarvených buněčných struktur pomocí fluorescenčního mikroskopu.
Anotace v angličtině
The bachelor thesis deals with one of the most important components of the extracellular matrix - collagen - and how it is produced using cell cultures in vitro. Collagen has nowadays become a highly desirable biomaterial due to its biocompatibility, biodegradability and excellent mechanical properties. It has found applications in a wide range of fields, including tissue engineering, regenerative medicine, the pharmaceutical and cosmetic industry, and others. In this work, a CAM sheet was produced using the human dermal fibroblast cell line. After devitalization and decellularization, a proliferation assay was performed to provide information on whether the cell-derived CAM sheet was a suitable scaffold for the growth of other cell line types. The evaluation was performed by observing the stained cell structures using a fluorescence microscope.
Studentka vypracuje literární rešerši na téma produkce kolagenu pro biomedicínské aplikace s důrazem na různé typy kolagenu i jejich vlastností a osvojí si základní techniky práce v laboratoři buněčné biologie.
Praktická část tématu bude založena na schopnosti buněčné samo-sestavě extracelulární matrix (CAM) fibroblastovými buňkami in vitro při dlouhodobé kultivaci.
Zásady pro vypracování
Studentka vypracuje literární rešerši na téma produkce kolagenu pro biomedicínské aplikace s důrazem na různé typy kolagenu i jejich vlastností a osvojí si základní techniky práce v laboratoři buněčné biologie.
Praktická část tématu bude založena na schopnosti buněčné samo-sestavě extracelulární matrix (CAM) fibroblastovými buňkami in vitro při dlouhodobé kultivaci.
Seznam doporučené literatury
SNUSTAD, D. P., SIMMONS, J. M., 2017. Genetika. Masarykova univerzita, Brno. ISBN: 978-80-210-8613-5.
ALBERTS, B., et al., 2014. Molecular Biology of the Cell. Sixth Edition. W. W. Norton & Company. ISBN: 978-0-8153-4464-3.
Kawiecki F., et al. 2022. Inter-donor variability of extracellular matrix production in long-term cultures of human fibroblasts. Biomaterials Science. (14): doi: 10.1039/d1bm01933c.
Torres Y.,et al. 2021. Cell-assembled extracellular matrix (CAM) sheet production: Translation from using human to large animal cells. Journal of Tissue Engineering. (12): doi:10.1177/2041731420978327.
Assuncao M., et al, 2020. Cell-derived extracellular matrix for tissue engineering and regenerative medicine. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology (8): doi: https://doi.org/10.3389/fbioe.2020.602009.
Seznam doporučené literatury
SNUSTAD, D. P., SIMMONS, J. M., 2017. Genetika. Masarykova univerzita, Brno. ISBN: 978-80-210-8613-5.
ALBERTS, B., et al., 2014. Molecular Biology of the Cell. Sixth Edition. W. W. Norton & Company. ISBN: 978-0-8153-4464-3.
Kawiecki F., et al. 2022. Inter-donor variability of extracellular matrix production in long-term cultures of human fibroblasts. Biomaterials Science. (14): doi: 10.1039/d1bm01933c.
Torres Y.,et al. 2021. Cell-assembled extracellular matrix (CAM) sheet production: Translation from using human to large animal cells. Journal of Tissue Engineering. (12): doi:10.1177/2041731420978327.
Assuncao M., et al, 2020. Cell-derived extracellular matrix for tissue engineering and regenerative medicine. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology (8): doi: https://doi.org/10.3389/fbioe.2020.602009.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
ilustrace, grafy, tabulky
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Studentka představila komisi výsledky své bakalářské práce. Poté byla komise seznámena s posudky a hodnocením vedoucího a oponenta (hodnocení vedoucího: A - výborně, hodnocení oponenta: A - výborně). V rámci posudků byly studentce položeny následující dotazy oponenta: Ing. Kateřina Skopalová, Ph.D. – V práci zmiňujete, že kolagen může být využíván jakožto přírodní materiál pro náhradu tkání. Jako jeden z příkladů zmiňujete kostní náhrady. Znáte nějaké syntetické materiály, které by se mohly využít namísto kolagenu pro tuto aplikaci? A zda u nich nalezneme oproti kolagenu výhody či nikoliv? ZODPOVĚZEN ZCELA; Kolagen je velmi obtížné sterilizovat, což popisujete jako jeho velkou nevýhodu. Jaké techniky byste tedy použila pro sterilizaci u materiálů obsahující kolagen? A jaké sterilizační postupy byste použila na Vámi připravených CAM sheet? ZODPOVĚZEN ZCELA; Z jakého důvodu jste zvolila pro testování proliferace na CAM sheet linii H9C2? ZODPOVĚZEN ZCELA
Poté byla vedena diskuze o bakalářské práci, během které byly jednotlivými členy komise položeny následující dotazy: Ing. Martina Polášková, Ph.D. - Co znamená zkratka CAM? ZODPOVĚZEN ZCELA; prof. Ing. Petr Humpolíček, Ph.D. - Jaké další komponenty extracelulární matrix obsahuje? ZODPOVĚZEN ZCELA; doc. Ing. Jana Sedlaříková, Ph.D. - V rámci růstové křivky jste zmínila, že by zde měla být i viditelná exponenciální fáze, jak si vysvětlujete, že v rámci Vašeho experimentu zde není? ZODPOVĚZEN ZCELA