Teoretická část bakalářské práce se zabývá základním anatomickým popisem lidské kůže
ajejím složením. V práci jsou charakterizovány hlavní buňky dermis i epidermis, produkty
jejich metabolické aktivity, a jejich vliv na funkce kůže. Dále je pozornost věnována
tkáňovému inženýrství kůže a kožním modelům, které napodobují strukturu kůže a slouží
jako alternativa k testování na zvířecích modelech in vivo. Praktická část se poté zabývá
popisem a provedením analytických metod pro charakterizaci chování buněčné linie
v různých experimentálních podmínkách. Na buněčné linii NIH/3T3 byla za běžných
podmínek kultivace stanovena růstová křivka, dále se sledovalo jejich chování v různých
koncentracích kolagenu typu I pomocí in vitro scratch assay. Poznatky z těchto metod byly
využity k přípravě trojrozměrného (3D) organotypického modelu kůže založené na
kokultivaci neonatálních keratinocytů s dermálními fibroblasty na kolagenovém základu.
Annotation in English
The theoretical part of the bachelor's thesis describes the basic anatomy of human skin and
its composition. This work characterizes the main cells of the dermis and epidermis together
with the products of their metabolic activity and influence on skin functions. Furthermore,
attention is paid to tissue engineering of the skin and skin models that mimic the native skin
and serve as an alternative to testing on animal models in vivo. The practical part then
describes and implements analytical methods for characterizing the behavior of the cell line
in various experimental conditions. Under normal cultivation conditions, a growth curve was
constructed for NIH/3T3 cell line. Additionally, their behavior in different concentrations of
type I collagen was monitored using an in vitro scratch assay. Knowledge from these
methods was used in the preparation of a three-dimensional (3D) organotypic skin model
based on the co-cultivation of neonatal keratinocytes with dermal fibroblasts on a collagen
base.
Teoretická část bakalářské práce se zabývá základním anatomickým popisem lidské kůže
ajejím složením. V práci jsou charakterizovány hlavní buňky dermis i epidermis, produkty
jejich metabolické aktivity, a jejich vliv na funkce kůže. Dále je pozornost věnována
tkáňovému inženýrství kůže a kožním modelům, které napodobují strukturu kůže a slouží
jako alternativa k testování na zvířecích modelech in vivo. Praktická část se poté zabývá
popisem a provedením analytických metod pro charakterizaci chování buněčné linie
v různých experimentálních podmínkách. Na buněčné linii NIH/3T3 byla za běžných
podmínek kultivace stanovena růstová křivka, dále se sledovalo jejich chování v různých
koncentracích kolagenu typu I pomocí in vitro scratch assay. Poznatky z těchto metod byly
využity k přípravě trojrozměrného (3D) organotypického modelu kůže založené na
kokultivaci neonatálních keratinocytů s dermálními fibroblasty na kolagenovém základu.
Annotation in English
The theoretical part of the bachelor's thesis describes the basic anatomy of human skin and
its composition. This work characterizes the main cells of the dermis and epidermis together
with the products of their metabolic activity and influence on skin functions. Furthermore,
attention is paid to tissue engineering of the skin and skin models that mimic the native skin
and serve as an alternative to testing on animal models in vivo. The practical part then
describes and implements analytical methods for characterizing the behavior of the cell line
in various experimental conditions. Under normal cultivation conditions, a growth curve was
constructed for NIH/3T3 cell line. Additionally, their behavior in different concentrations of
type I collagen was monitored using an in vitro scratch assay. Knowledge from these
methods was used in the preparation of a three-dimensional (3D) organotypic skin model
based on the co-cultivation of neonatal keratinocytes with dermal fibroblasts on a collagen
base.
I. Teoretická část:
Student vypracuje literární rešerši na danou problematiku a osvojí si základní techniky práce v laboratoři buněčné biologie.
II. Praktická část:
V rámci praktické části tématu bude provedena příprava organotypického modelu kůže založena na in vitro kokultivaci neonatálních keratinocytů s dermálními fibroblasty na kolagenovém základu.
Research Plan
I. Teoretická část:
Student vypracuje literární rešerši na danou problematiku a osvojí si základní techniky práce v laboratoři buněčné biologie.
II. Praktická část:
V rámci praktické části tématu bude provedena příprava organotypického modelu kůže založena na in vitro kokultivaci neonatálních keratinocytů s dermálními fibroblasty na kolagenovém základu.
Recommended resources
[1] SNUSTAD, D. Peter, SIMMONS, J. Michael, 2017. Genetika. Masarykova univerzita, Brno. ISBN: 978-80-210-8613-5.
[2] ALBERTS, B., et al., 2014. Molecular Biology of the Cell. Sixth Edition. W. W. Norton & Company. ISBN: 978-0-8153-4464-3.
[3] Stark, H. J. et al. 2004. Organotypic co-cultures as skin equivalents: A complex and sophisticated in vitro system. Biological Procedures Online. (6): 55-60. doi: 10.1251/bpo72.
[4] Won Oh, J., et al. 2013. Organotypic Skin Culture. Journal of Investigative Dermatology 133(11): e14. doi:10.1038/jid.2013.387.
[5] Owczarzy A., et al. 2020. Collagen – structure, properties and applications. Engineering of Biomaterials (156):17–23. https://doi.org/10.34821/eng.biomat.156.2020.17-23.
Recommended resources
[1] SNUSTAD, D. Peter, SIMMONS, J. Michael, 2017. Genetika. Masarykova univerzita, Brno. ISBN: 978-80-210-8613-5.
[2] ALBERTS, B., et al., 2014. Molecular Biology of the Cell. Sixth Edition. W. W. Norton & Company. ISBN: 978-0-8153-4464-3.
[3] Stark, H. J. et al. 2004. Organotypic co-cultures as skin equivalents: A complex and sophisticated in vitro system. Biological Procedures Online. (6): 55-60. doi: 10.1251/bpo72.
[4] Won Oh, J., et al. 2013. Organotypic Skin Culture. Journal of Investigative Dermatology 133(11): e14. doi:10.1038/jid.2013.387.
[5] Owczarzy A., et al. 2020. Collagen – structure, properties and applications. Engineering of Biomaterials (156):17–23. https://doi.org/10.34821/eng.biomat.156.2020.17-23.
