Cílem této práce bylo navrhnout metodu současného stanovení vybraných volných amino-kyselin a biogenních aminů pomocí kapalinové chromatografie. Teoretická část obsahuje informace o vzniku biogenních aminů, kde jsou popsány syntézy jednotlivých biogenních aminů. Je zde také popsán význam sledování biogenních aminů zejména pro jejich vyso-kou toxicitu. Biogenní aminy a aminokyseliny jdou stanovit více metodami, které jsou také obsaženy v teoretické části a nemalou částí obsahu teoretické části je i výčet derivatizač-ních činidel používaných v kapalinové chromatografii pro stanovení biogenních aminů a aminokyselin.
V praktické části byla využita kapalinová chromatografie s použitím derivatizačního čini-dla FMOC-Cl ke stanovení volných aminokyselin a biogenních aminů. Povedlo se součas-ně separovat tyrozin a tyramin v reálných vzorcích.
Anotace v angličtině
The goal of this work is to devise a simultaneous determination method of given free amino acids and biogenic amines by liquid chromatography. Theoretical part informs about formation of biogenic amines, describing synthesis of particular biogenic amines. The sig-nificance of observing biogenic amines is described as well, especially for its serious toxic-ity. It is possible to identify the biogenic amines and the amino acids using more methods comprehended in this theoretical part and major part of the theoretical part is an enumera-tion of the derivatization reagents used in liquid chromatography to assess biogenic amines and amino acids.
In my practical part I use the liquid chromatography notably derivatization reagent FMOC-Cl to define free amino acids and biogenic amines. I succeeded separating tyrosine and tyramine all at once.
Cílem této práce bylo navrhnout metodu současného stanovení vybraných volných amino-kyselin a biogenních aminů pomocí kapalinové chromatografie. Teoretická část obsahuje informace o vzniku biogenních aminů, kde jsou popsány syntézy jednotlivých biogenních aminů. Je zde také popsán význam sledování biogenních aminů zejména pro jejich vyso-kou toxicitu. Biogenní aminy a aminokyseliny jdou stanovit více metodami, které jsou také obsaženy v teoretické části a nemalou částí obsahu teoretické části je i výčet derivatizač-ních činidel používaných v kapalinové chromatografii pro stanovení biogenních aminů a aminokyselin.
V praktické části byla využita kapalinová chromatografie s použitím derivatizačního čini-dla FMOC-Cl ke stanovení volných aminokyselin a biogenních aminů. Povedlo se součas-ně separovat tyrozin a tyramin v reálných vzorcích.
Anotace v angličtině
The goal of this work is to devise a simultaneous determination method of given free amino acids and biogenic amines by liquid chromatography. Theoretical part informs about formation of biogenic amines, describing synthesis of particular biogenic amines. The sig-nificance of observing biogenic amines is described as well, especially for its serious toxic-ity. It is possible to identify the biogenic amines and the amino acids using more methods comprehended in this theoretical part and major part of the theoretical part is an enumera-tion of the derivatization reagents used in liquid chromatography to assess biogenic amines and amino acids.
In my practical part I use the liquid chromatography notably derivatization reagent FMOC-Cl to define free amino acids and biogenic amines. I succeeded separating tyrosine and tyramine all at once.
Popište význam sledování obsahu biogenních aminů v potravinách.
Charakterizujte metody stanovení obsahu biogenních aminů v potravinách
se zaměřením na metody využívající kapalinovou chromatografii.
II. Praktická část
Optimalizujte metodu stanovení obsahu biogenních aminů s využitím
kapalinové chromatografie.
Zhodnoťte použitelnost optimalizované metody na vybrané druhy potravin.
Zásady pro vypracování
I. Teoretická část
Popište význam sledování obsahu biogenních aminů v potravinách.
Charakterizujte metody stanovení obsahu biogenních aminů v potravinách
se zaměřením na metody využívající kapalinovou chromatografii.
II. Praktická část
Optimalizujte metodu stanovení obsahu biogenních aminů s využitím
kapalinové chromatografie.
Zhodnoťte použitelnost optimalizované metody na vybrané druhy potravin.
Seznam doporučené literatury
[1] SANTOS, S. Biogenic amines: their importance in foods. Int. J. Food Microbiol., 1996, vol. 29, p. 213?231 \vsp{1,5mm}
[2] KIRSCHBAUM, J., LUCKAS, B., BEINERT, W., Pre-column derivatization of biogenic amines and amino acids with 9-fluorenylmethyl chloroformate and heptylamine. J. Chromatogr., A, 1994, vol. 661, p. 193?199 \vsp{1,5mm}
[3] EKEGREN T., GOMES-TROLIN, C., Determination of polyamines in human tissues by precolumn derivatization with 9-fluorenylmethyl chloroformate and high-performance liquid chromatography. Anal. Biochem., 2005, vol. 338, p. 179?185 \vsp{1,5mm}
Seznam doporučené literatury
[1] SANTOS, S. Biogenic amines: their importance in foods. Int. J. Food Microbiol., 1996, vol. 29, p. 213?231 \vsp{1,5mm}
[2] KIRSCHBAUM, J., LUCKAS, B., BEINERT, W., Pre-column derivatization of biogenic amines and amino acids with 9-fluorenylmethyl chloroformate and heptylamine. J. Chromatogr., A, 1994, vol. 661, p. 193?199 \vsp{1,5mm}
[3] EKEGREN T., GOMES-TROLIN, C., Determination of polyamines in human tissues by precolumn derivatization with 9-fluorenylmethyl chloroformate and high-performance liquid chromatography. Anal. Biochem., 2005, vol. 338, p. 179?185 \vsp{1,5mm}
Přílohy volně vložené
CD ROM
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
dr. Vícha, řada připomínek
V jaké podobě prochází stanovená látka kolonou?
prof. Potáček: Kde se v záznamu spekter projevují jednotlivé deriváty?
doc. Janiš: Z jakého důvodu byla prováděna derivatizace? Co kdyby se neprováděla derivatizace a použila se jiná metoda?
Student uspokojivě zodpověděl dotazy členů komise.