Bakalářská práce pojednává o jedné z nejdůležitější složek extracelulární matrix - kolagenu - a její produkci pomocí buněčných kultur in vitro. Kolagen se v současné době stal díky své biokompatibilitě, biodegradabilitě a skvělým mechanickým vlastnostem velmi žádaným biomateriálem. Využití našel v mnoha oblastech, mezi které patří tkáňové inženýrství, regenerativní medicína, farmaceutický či kosmetický průmysl a další. V této práci byl za pomoci buněčné linie lidských dermálních fibroblastů vytvořen CAM sheet, po jehož devitalizaci a decelularizaci byl proveden proliferační test sloužící k poskytnutí informace, zda je buňkami vytvořený CAM sheet vhodným scaffoldem pro růst jiných typů buněčných linií. Vyhodnocení proběhlo sledováním nabarvených buněčných struktur pomocí fluorescenčního mikroskopu.
Annotation in English
The bachelor thesis deals with one of the most important components of the extracellular matrix - collagen - and how it is produced using cell cultures in vitro. Collagen has nowadays become a highly desirable biomaterial due to its biocompatibility, biodegradability and excellent mechanical properties. It has found applications in a wide range of fields, including tissue engineering, regenerative medicine, the pharmaceutical and cosmetic industry, and others. In this work, a CAM sheet was produced using the human dermal fibroblast cell line. After devitalization and decellularization, a proliferation assay was performed to provide information on whether the cell-derived CAM sheet was a suitable scaffold for the growth of other cell line types. The evaluation was performed by observing the stained cell structures using a fluorescence microscope.
Bakalářská práce pojednává o jedné z nejdůležitější složek extracelulární matrix - kolagenu - a její produkci pomocí buněčných kultur in vitro. Kolagen se v současné době stal díky své biokompatibilitě, biodegradabilitě a skvělým mechanickým vlastnostem velmi žádaným biomateriálem. Využití našel v mnoha oblastech, mezi které patří tkáňové inženýrství, regenerativní medicína, farmaceutický či kosmetický průmysl a další. V této práci byl za pomoci buněčné linie lidských dermálních fibroblastů vytvořen CAM sheet, po jehož devitalizaci a decelularizaci byl proveden proliferační test sloužící k poskytnutí informace, zda je buňkami vytvořený CAM sheet vhodným scaffoldem pro růst jiných typů buněčných linií. Vyhodnocení proběhlo sledováním nabarvených buněčných struktur pomocí fluorescenčního mikroskopu.
Annotation in English
The bachelor thesis deals with one of the most important components of the extracellular matrix - collagen - and how it is produced using cell cultures in vitro. Collagen has nowadays become a highly desirable biomaterial due to its biocompatibility, biodegradability and excellent mechanical properties. It has found applications in a wide range of fields, including tissue engineering, regenerative medicine, the pharmaceutical and cosmetic industry, and others. In this work, a CAM sheet was produced using the human dermal fibroblast cell line. After devitalization and decellularization, a proliferation assay was performed to provide information on whether the cell-derived CAM sheet was a suitable scaffold for the growth of other cell line types. The evaluation was performed by observing the stained cell structures using a fluorescence microscope.
Studentka vypracuje literární rešerši na téma produkce kolagenu pro biomedicínské aplikace s důrazem na různé typy kolagenu i jejich vlastností a osvojí si základní techniky práce v laboratoři buněčné biologie.
Praktická část tématu bude založena na schopnosti buněčné samo-sestavě extracelulární matrix (CAM) fibroblastovými buňkami in vitro při dlouhodobé kultivaci.
Research Plan
Studentka vypracuje literární rešerši na téma produkce kolagenu pro biomedicínské aplikace s důrazem na různé typy kolagenu i jejich vlastností a osvojí si základní techniky práce v laboratoři buněčné biologie.
Praktická část tématu bude založena na schopnosti buněčné samo-sestavě extracelulární matrix (CAM) fibroblastovými buňkami in vitro při dlouhodobé kultivaci.
Recommended resources
SNUSTAD, D. P., SIMMONS, J. M., 2017. Genetika. Masarykova univerzita, Brno. ISBN: 978-80-210-8613-5.
ALBERTS, B., et al., 2014. Molecular Biology of the Cell. Sixth Edition. W. W. Norton & Company. ISBN: 978-0-8153-4464-3.
Kawiecki F., et al. 2022. Inter-donor variability of extracellular matrix production in long-term cultures of human fibroblasts. Biomaterials Science. (14): doi: 10.1039/d1bm01933c.
Torres Y.,et al. 2021. Cell-assembled extracellular matrix (CAM) sheet production: Translation from using human to large animal cells. Journal of Tissue Engineering. (12): doi:10.1177/2041731420978327.
Assuncao M., et al, 2020. Cell-derived extracellular matrix for tissue engineering and regenerative medicine. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology (8): doi: https://doi.org/10.3389/fbioe.2020.602009.
Recommended resources
SNUSTAD, D. P., SIMMONS, J. M., 2017. Genetika. Masarykova univerzita, Brno. ISBN: 978-80-210-8613-5.
ALBERTS, B., et al., 2014. Molecular Biology of the Cell. Sixth Edition. W. W. Norton & Company. ISBN: 978-0-8153-4464-3.
Kawiecki F., et al. 2022. Inter-donor variability of extracellular matrix production in long-term cultures of human fibroblasts. Biomaterials Science. (14): doi: 10.1039/d1bm01933c.
Torres Y.,et al. 2021. Cell-assembled extracellular matrix (CAM) sheet production: Translation from using human to large animal cells. Journal of Tissue Engineering. (12): doi:10.1177/2041731420978327.
Assuncao M., et al, 2020. Cell-derived extracellular matrix for tissue engineering and regenerative medicine. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology (8): doi: https://doi.org/10.3389/fbioe.2020.602009.
