|
Vyučující
|
-
Ingr Marek, doc. RNDr. Ph.D.
|
|
Obsah předmětu
|
1. Úvod do separačních metod, historický přehled. 2. Principy dělení látek, mezimolekulové interakce a vlastnosti látek z nich vyplývající. 3. Zpracování komplexního biologického materiálu, základní separační metody (filtrace, extrakce, srážení, vysolování). 4. Elektromigrační separační metody - teoretický základ. 5. Kapilární zónová elektroforéza, izotachoforéza, izoelektrická fokusace - principy a aplikace. 6. Gelové elektroforézy a speciální elektromigrační metody (sekvenace DNA, MEKC). 7. Sedimentační metody jako nástroj analýzy přírodních látek. Metoda sedimentační rychlosti. 8. Sedimentační rovnováha, aplikace na rovnováhy oligomerních proteinů a polydisperzní vzorky polymerů. Izopyknická centrifugace. 9. Chromatografické metody - základní principy chromatografie, analýza výsledků, chromatografie prováděné v izokratickém režimu, gelová permeační chromatografie - principy a příklady použití. Kapalinová a plynová chromatografie. 10. Gradientové chromatografické metody - iontoměničová chromatografie, hydrofobní chromatografie, chromatografie na reverzní fázi, afinitní chromatografie - principy a příklady použití. Tenkovrstevná chromatografie. 11. Detekční metody v chromatografických a elektromigračních metodách - základy spektrofotometrie a fluorimetrie, detekce v plynové chromatografii. 12. Refraktometrie, konduktometrie, základy hmotnostní spektrometrie. 13. Stanovení koncentrací biologicky aktivních látek - kolorimetrická stanovení proteinů, aminokyselinová analýza, sekvenace proteinů, stanovení koncentrace DNA, metoda PCR a qPCR. 14. Imunologické metody, blotování, ELISA, průtoková cytometrie.
|
|
Studijní aktivity a metody výuky
|
Přednášení, Laborování
- Účast na výuce
- 16 hodin za semestr
- Domácí příprava na výuku
- 20 hodin za semestr
- Příprava na zkoušku
- 54 hodin za semestr
|
| Výsledky učení |
|---|
| Odborné znalosti |
|---|
| popsat základní separační metody |
| popsat základní separační metody |
| vysvětlit elektromigrační separační metody |
| vysvětlit elektromigrační separační metody |
| charakterizovat sedimentační metody |
| charakterizovat sedimentační metody |
| roztřídit chromatografické metody |
| roztřídit chromatografické metody |
| definovat imunologické metody |
| definovat imunologické metody |
| Odborné dovednosti |
|---|
| aplikovat elektroforézu pro analýzu vzorku |
| aplikovat elektroforézu pro analýzu vzorku |
| vyhodnotit chromatogram |
| vyhodnotit chromatogram |
| stanovit koncentraci DNA metodou PCR |
| stanovit koncentraci DNA metodou PCR |
| aplikovat gelovou chromatografii |
| aplikovat gelovou chromatografii |
| vypočítat sedimentační rychlost |
| vypočítat sedimentační rychlost |
| Vyučovací metody |
|---|
| Odborné znalosti |
|---|
| Přednášení |
| Přednášení |
| Dialogická (diskuze, rozhovor, brainstorming) |
| Dialogická (diskuze, rozhovor, brainstorming) |
| Odborné dovednosti |
|---|
| Laborování |
| Laborování |
| Praktické procvičování |
| Praktické procvičování |
| Hodnotící metody |
|---|
| Odborné znalosti |
|---|
| Analýza seminární práce |
| Analýza seminární práce |
| Ústní zkouška |
| Ústní zkouška |
| Známkou |
| Známkou |
|
Doporučená literatura
|
-
Prezentace z přednášky.
-
ATKINS, P.W. Atkins´ Physical Chemistry. 10th Ed. New York: Oxford University Press, 2014. ISBN 9780199697403.
-
Kodíček, M., Karpenko, V. Biofyzikální chemie. Praha, 1997.
-
Nováková, L., Douša, M. Moderní HPLC separace v teorii a praxi I.. Hradec Králové, Klatovy. ISBN 978-80-260-4243-3.
-
Nováková, L., Douša, M. Moderní HPLC separace v teorii a praxi II.. Hradec Králové, Klatovy. ISBN 978-80-260-4244-0.
-
Prosser, V. a kol. Experimentální metody biofyziky. . Praha, 1989.
-
Štulík, Karel. Analytické separační metody. 1. vyd. Praha : Karolinum, 2004. ISBN 80-246-0852-9.
-
WILSON, I.D. (Ed.). Encyclopedia of Separation Science.. New York: Academic Press, 2000.
|