Diplomová práce se zabývala isolací bakterií, schopných rozkladu polymeru ? polyvinylalkoholu (PVA) za denitrifikačních podmínek. Výchozím vzorkem pro tuto isolaci byl denitrifikační kal adaptovaný na PVA. Samotnou izolaci kultur schopných rozkladu PVA předcházelo jejich namnožení pomocí lahvových pomnožovacích cyklů s polyvinylalkoholem jako hlavním substrátem. Poté bylo provedeno vyočkování získaných suspenzí na pevná živná média, kultivace za denitrifikačních podmínek, přeočkovávání a čištění vyrostlých kolonií. U jednotlivých izolovaných kultur bylo následně provedeno Gramovo barvení, které prokázalo, že téměř všechny izolované kultury jsou gramnegativní. Dále byly u kultur sledovány růstové podmínky, kde bylo zjištěno vhodné živné médium pro jejich růst a prostředí kultivace (aerobní, mikroaerofilní). Jednotlivé kultury byly následně podrobeny denitrifikačním testům, které ukázaly, že téměř všechny izolované kultury jsou schopné denitrifikace. V testu denitrifikace s využitím PVA byl zaznamenán mírný náznak degradace PVA u dvou kultur. Jednotlivé kultury byly zakonzervovány pro případ jejich dalšího studování.
Annotation in English
This Diploma thesis dealt with isolation of bacteria capable of degradation of polyvinylalcohol (PVA) under denitrifying conditions. Denitrifying sludge acclimated to the PVA was used as initial sample for the process. The isolation of cultures capable of PVA degradation was started by repeated multiplication of bacteria in several cycles using PVA as the only substrate. After that, obtained bacterial suspensions were inoculated onto solid agar media, incubated and the growing colonies were re-inoculated onto fresh media and purified. Isolated strains were then Gram-stained, which showed that almost all isolated bacteria were gramnegative. In all obtained strains optimal growing conditions as well as suitable agar type were also determined. Individual bacteria were subsequently subjected to denitrifying tests, which showed that almost all isolated microbes were capable of denitrification. The denitrification test using PVA as carbon source showed a slight level of PVA degradation in two strains. All the bacteria obtained in the study were maintained for further study.
Keywords
polyvinylalkohol, denitrifikační bakterie, izolace, kultury
Diplomová práce se zabývala isolací bakterií, schopných rozkladu polymeru ? polyvinylalkoholu (PVA) za denitrifikačních podmínek. Výchozím vzorkem pro tuto isolaci byl denitrifikační kal adaptovaný na PVA. Samotnou izolaci kultur schopných rozkladu PVA předcházelo jejich namnožení pomocí lahvových pomnožovacích cyklů s polyvinylalkoholem jako hlavním substrátem. Poté bylo provedeno vyočkování získaných suspenzí na pevná živná média, kultivace za denitrifikačních podmínek, přeočkovávání a čištění vyrostlých kolonií. U jednotlivých izolovaných kultur bylo následně provedeno Gramovo barvení, které prokázalo, že téměř všechny izolované kultury jsou gramnegativní. Dále byly u kultur sledovány růstové podmínky, kde bylo zjištěno vhodné živné médium pro jejich růst a prostředí kultivace (aerobní, mikroaerofilní). Jednotlivé kultury byly následně podrobeny denitrifikačním testům, které ukázaly, že téměř všechny izolované kultury jsou schopné denitrifikace. V testu denitrifikace s využitím PVA byl zaznamenán mírný náznak degradace PVA u dvou kultur. Jednotlivé kultury byly zakonzervovány pro případ jejich dalšího studování.
Annotation in English
This Diploma thesis dealt with isolation of bacteria capable of degradation of polyvinylalcohol (PVA) under denitrifying conditions. Denitrifying sludge acclimated to the PVA was used as initial sample for the process. The isolation of cultures capable of PVA degradation was started by repeated multiplication of bacteria in several cycles using PVA as the only substrate. After that, obtained bacterial suspensions were inoculated onto solid agar media, incubated and the growing colonies were re-inoculated onto fresh media and purified. Isolated strains were then Gram-stained, which showed that almost all isolated bacteria were gramnegative. In all obtained strains optimal growing conditions as well as suitable agar type were also determined. Individual bacteria were subsequently subjected to denitrifying tests, which showed that almost all isolated microbes were capable of denitrification. The denitrification test using PVA as carbon source showed a slight level of PVA degradation in two strains. All the bacteria obtained in the study were maintained for further study.
Keywords
polyvinylalkohol, denitrifikační bakterie, izolace, kultury
1. Vypracujte literární rešerši zaměřenou převážně na způsoby isolace denitrifikačních bakterií s degradačními vlastnostmi. 2. Proveďte namnožení denitrifikačních bakterií se schopností rozkladu polyvinylalkoholu. 3. Pokuste se isolovat druhy bakterií, klíčové pro tento proces a v případě jejich nálezu popište jejich základní vlastnosti. 4. Získané výsledky zpracujte v požadované formě a odevzdejte v řádném termínu v tištěné i elektronické podobě.
Research Plan
1. Vypracujte literární rešerši zaměřenou převážně na způsoby isolace denitrifikačních bakterií s degradačními vlastnostmi. 2. Proveďte namnožení denitrifikačních bakterií se schopností rozkladu polyvinylalkoholu. 3. Pokuste se isolovat druhy bakterií, klíčové pro tento proces a v případě jejich nálezu popište jejich základní vlastnosti. 4. Získané výsledky zpracujte v požadované formě a odevzdejte v řádném termínu v tištěné i elektronické podobě.
Recommended resources
1.Předcházející diplomové práce věnované mikrobiálnímu rozkladu polyvinylalkoholu. 2.Vědecká literatura získaná prostřednictvím databází Web of Science, ScienceDirect (zvláště SCOPUS), SpringerLink, Medline, WileyOnLine a SciFinder.
Recommended resources
1.Předcházející diplomové práce věnované mikrobiálnímu rozkladu polyvinylalkoholu. 2.Vědecká literatura získaná prostřednictvím databází Web of Science, ScienceDirect (zvláště SCOPUS), SpringerLink, Medline, WileyOnLine a SciFinder.
